精液检验及常见问题 段忠亮 复旦大学附属妇产科医院 据世界卫生组织估计,全球约有将近2亿的育龄夫妇存在生育问题,其中男方因素约占一半[1]。精液常规分析是男性生育力评估和男科疾病诊治的最常用临床检测,该项检查可以较为直观地分析出精液的主要特征,对精子的主要特性也能较好地描述[2];除了直观的检测分析,对精子的质量分析也很重要,其中精子DNA碎片指数检查主要是检测精子DNA碎片率,从遗传物质的角度分析精子的完整情况,已经成为反映男性生育能力的一个独立的临床指标,在临床上用以辅助诊断生殖相关疾病[3]。这两项检查在自然生育和宫腔内人工授精等体内受精方式的生育能力的检测方面应用广泛,对体外受精和单精子卵胞浆内注射术等方面应用也有一定的指导意义。现就精液常规检查和精子DNA碎片指数检测,向大家做一个科普介绍。 一、精液的基本知识 1. 精液的组成,主要由精子、精浆和一些其他成分组成。 精子:精子在精液中所占的比重大概在5%左右,精子是在睾丸内生精细胞中生成的,在附睾中运行、储存并成熟。 精浆:精浆主要由前列腺、精囊腺和尿道球腺分泌的液体混合物,其中精囊分泌的液体约占60%,前列腺液约占30%。精浆的主要生理功能是辅助精子生存、活动和输送。 其他成分:精浆中包含很多复杂的生化成分和无机元素,除水、果糖、蛋白质和脂肪外,还含有多种酶类和无机盐。 2.精子检测的主要过程 建议手淫取精,手淫时不能采用润滑剂等矿物性物质,特殊情况下可采用特制的对精子无毒性的避孕套进行精液采集,并于采集后1小时内送到实验室(最好30分钟内送到)。排出体外后,精液由胶冻状转变为水样,这一过程叫做液化,液化的时间过长和液化不完全会显著影响精子的质量,进而影响女方受孕。液化后的精液,会使用经过校准的计数板上机检测。 二、精液常见检验 1.精液检查的主要项目 精液常规分析:包括精子的浓度(主要反映的是精子的数量)、活力(主要反映的是精子的状态)、形态(评估精子头部、中段和尾部等部位的形态是否正常或畸形)等。 精子DNA完整性检查:评估精子的遗传物质完整性。 2.精液常规的检查方法及其原理 精液常规检查是临床上最普遍且价格较便宜的检查。通过将显微镜与摄像机连接,跟踪和确定单个精子的活动,并根据精子运动的位移、精子大小和灰度及运动的有关参数。利用计算机对采集到的图像进行动态处理分析,并报告结果。当光束通过液化的精液时,精液中精子的运动可引起光密度变化,光密度变化包括频率和振幅的变化,如图1所示。 随着人工智能的应用,机器判断精子浓度、活力等指标的准确度也越来越高。 图1 仪器自动识别精子及跟踪精子运动图 3.精液常规的质量标准 外观:正常液化精液呈现均质性、淡黄色或灰白色。 精子形态:头部、颈部、体部和尾部的正常率要仔细记录。 液化时间:精液到收集容器后很快开始液化,通常在15~30分钟内完全液化。 上面三项,更多地依赖检验人员的观察,随后计算机会计算出精液常规的主要项目,报告上会有参考范围供大家参考。常规检查常包括二十多项指标,其中浓度和前向运动的精子百分比绝对是临床医生最关注的两个指标。 4.精子DNA碎片指数检测 原理:受损精子核中的染色质经酸处理后成单链,与染料吖啶橙结合发红色或黄色荧光;正常精子核中的染色质能保持完整的双链结构,与吖啶橙结合发绿色荧光。精液样品在经过变性处理和染色后,若红光比例增高,就说明精子核完整性受损程度增加。临床上检测方法多为流式细胞仪的方法(吖啶橙染色法),如图2所示。另外,在精子的成熟过程中,鱼精蛋白取代组蛋白,染色质浓缩,染料不容易进入,故成熟的精子染色荧光较弱,荧光强则代表不成熟的精子。 图2 精子DNA碎片指数流式图 三、临床常见咨询的问与答 1.如何保护和提高精子质量? 避免过热:避免长时间暴露在高温环境中,如热水浴、桑拿和热水泡澡。 合理饮食:保持均衡的饮食,摄入足够的维生素、矿物质和抗氧化剂;增加摄入富含锌、硒、维生素C和E的食物,如坚果、鱼类、绿叶蔬菜和水果。 心理调适:保持良好心态,通过散步、洗澡、适度锻炼等方式放松。 节劳:避免过度劳累和熬夜,合理安排工作、学习和休息时间。 2.禁欲时间多少天合适? 一般建议禁欲2-7天检测,这样后续复查时可以更好地把握时间,以形成对比;时间过短于2天,可能会使射出精子过少;禁欲时间过长,则可导致死精子含量增多。 3.精液在家留取可以吗? 可以,不过送检的路上注意保温,最好控制在体温的水平,不要冷藏或冷冻。 4.精液过多为什么不好 一般正常精液量在2-5毫升左右,过多时多是精浆的增多,可能是炎症或其他疾病的表现。 5.检测时视野选取 显微镜下观察时,不能选取有气泡的地方,尽量不要选取有精子凝集的地方。 6.如果同时测小便常规和精液常规,哪个先? 有部分体检人群会同时做尿常规和精液常规,这个时候要先做尿常规,再做精液常规。因为取精后,尿道会残留部分精液,而精液中含有大量蛋白质,会严重影响到尿常规的检测。 7.只做精子碎片不做精液常规,是否仍需要按照常规的要求? 是的,有部分病人本次只做精子DNA碎片指数检测,不做常规检测,但是大部分医院DNA碎片指数不是每天都做的,有时需要放在冰箱里冷冻,收集一定数量标本后,再解冻后检测。这时前处理依然要像做精液常规检测的要求那样,包括禁欲时间相似,且要液化后或在温箱中放置1小时左右再放入冰箱。 8.如果检测不能达到参考范围,是不是就不能怀孕? 不是的,理论上即使浓度、活力或精子DNA碎片指数等指标都达不到参考数值,只要有一定数量的正常精子,就可以正常怀孕,但是正常受孕的概率会显著下降。 参考资料 [1] INHORN M C, PATRIZIO P. Infertility around the globe: new thinking on gender, reproductive technologies and global movements in the 21st century[J]. Hum Reprod Update, 2015,21(4): 411-426. [2] 中国性学会生殖检验分会《精液常规分析中国专家共识》编写组. 精液常规分析中国专家共识[J]. 中国男科学杂志, 2023,37(02): 3-12. [3] 石雯茜, 段忠亮, 梁昀. 精子DFI与精液常规的相关性分析及在相关疾病中的表达[J]. 中国优生与遗传杂志, 2018,26(10): 118-119, 61. (责任编辑:) |